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糖化白蛋白檢測(過氧化物酶法)的檢驗原理
糖類的營養價值主要是供給能量,此外糖也是人體的重要組成成分之一。正常人體內糖代謝的中心問題之一是維持血糖濃度的相對恒定。臨床上重要的糖代謝紊亂也主要是血糖濃度過高(高血糖癥)和過低(低血糖癥)。
 
糖化蛋白是指血液中已糖通過非酶促作用,將糖基加到蛋白質的氨基酸基團上形成的不可逆糖蛋白結合物,一般分為糖化血紅蛋白(HbA1c)以及糖化白蛋白(GA)。
 
關于糖化白蛋白檢測(過氧化物酶法):
 
(1)預期用途(Intended Use)
 
用于體外定量測定人血清中糖化白蛋白(GA)和白蛋白(ALB),得出的糖化白蛋白濃度除以白蛋白濃度算出糖化白蛋白的比值(%)。本試劑僅應用于體外診斷試驗。
 
(2)檢驗原理
 
1、GA的測定
 
在樣本(血清或血漿)中,首先加入對白蛋白有特異性的蛋白酶,分解糖化白蛋白,生成糖化氨基酸;然后糖化氨基酸在特異性果糖基氨基酸氧化酶(FAOD-E)的作用下變成葡萄糖醛酮、氨基酸和過氧化氫;在過氧化物酶的作用下,過氧化氫與4-氨基安替比啉和2-羥基-3-間甲苯胺丙磺酸鈉發生Trinder反應,生成紅色醌亞胺,測定其吸光度變化,得到樣本中糖化白蛋白的濃度。
 
2、ALB的測定利用白蛋白可與某些陰離子染料結合,而球蛋白基本不結合這些染料的特性,血清白蛋白(ALB)的檢測可根據使用試劑的不同分為BCG法(bromcresol green,溴甲酚綠)和BCP法(bromcresol purple,溴甲酚紫)。因BCG法靈敏度高、重復性好,目前國內ALB的檢測以BCG法最為常用,但BCG對血清白蛋白特異性稍差,BCP法測定白蛋白能有效增強低蛋白血癥患者中測定結果的可信度,可以避免抗壞血酸及高熱量氨基酸輸液對檢測結果的影響[5]。
 
3、糖化白蛋白值(%)的計算
 
利用得出的GA濃度除以ALB濃度,計算出樣本的糖化白蛋白(%)。
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